Uidheam glanaidh Oligo airson synthesis primer Oligo,
inneal taic synthesis oligo,
Bùird co-fhreagarrach | 1, 3, 5, 8. |
Criathradh | sìoladh sèididh, sìoladh suidse |
An àireamh de phuirt stealladh | 5, 6, 7, 8, 9, 10. |
Seòrsaichean plàta co-fhreagarrach | Plàta C18, truinnsear tobar domhainn, truinnsear synthetigeach (co-chosmhail ris a’ mhòr-chuid de phlàtaichean synthetigeach), plàta microtiter |
Modal | aon axis no dà axis |
Bholtaids | 220V |
Barantas | 1 bhliadhna |
Gnàthach | Air gabhail ris |
1. Gel Electrophoresis Chromatography Purification
Cleachd cromatagrafaidheachd electrophoresis gel polyacrylamide dì-nàdurrach airson glanadh.Is e an àidseant dì-nàdurrach sa chumantas 4M formamide no 7M urea, tha an dùmhlachd de acrylamide eadar 5-15%, agus tha a’ chuibhreann de methacrylamide sa mhòr-chuid eadar 2-10%.
Às deidh electrophoresis, feumar suidheachadh a ’chòmhlain searbhag niuclasach a dhearbhadh fo irradachadh solas ultraviolet, tha an gel anns a bheil an searbhag niuclasach targaid air a ghearradh dheth, tha an searbhag niuclasach air a bhriseadh agus air a leacadh, agus an uairsin tha am fuasgladh leaching air a chuimseachadh, air a mhilleadh, air a thomhas agus air a lyophilized.
2. DMT-On, HPLC Purification
Tagh am modh DMT-On rè an synthesis, chaidh an toradh amh a mheadhanachadh agus a chuimseachadh aig teòthachd an t-seòmair gus cus ammonia a thoirt air falbh às deidh an aminolysis.
Chaidh sgaradh a dhèanamh le bhith a’ cleachdadh colbh C18 le acetonitrile agus searbhag triethylamine-acetic 10% (TEAA) mar an eluent.Às deidh an elution a chrìochnachadh, tha e air a chuimseachadh, agus an uairsin thèid am buidheann DMT a thoirt air falbh le searbhag trifluoroacetic.Às deidh neodachadh, thèid cuid de shalainn agus moileciuilean beaga a thoirt air falbh tro phìob gearraidh, agus mu dheireadh thèid an sailleadh.
Faodaidh an dòigh seo toradh fhaighinn le purrachd nas àirde, ach feumar aire a thoirt don tachartas depurination.
3. DMT-Off, HPLC Purification
Tagh an DMT-Off rè an synthesis, agus chaidh an toradh amh a mheadhanachadh agus a chuimseachadh aig teòthachd an t-seòmair gus cus ammonia a thoirt air falbh às deidh ammonolysis.
Chaidh sgaradh a dhèanamh le bhith a’ cleachdadh colbh C18 le acetonitrile agus searbhag triethylamine-acetic 10% ann an uisge mar eluent.Às deidh an dealachadh a chrìochnachadh agus a thomhas, tha na h-aliquots air an lyophilized.
Feumaidh an dòigh seo atharrachadh gu faiceallach air suidheachaidhean dealachaidh, agus faodaidh e cuideachd moileciuilean targaid fìor fhìor fhaighinn.
Bidh uidheamachd accerry synthesis oligo airson cearcall synthesis dna rna, a tha freagarrach airson primer àbhaisteach, agus primer slabhraidh goirid eile, a ’dèanamh an oligo fìor-ghlan.
neach-dèanamh china de uidheamachd oligo synthesis le deagh chàileachd agus seirbheis as fheàrr.